10.3321/j.issn:0366-6964.2005.12.014
猪瘟病毒E2基因在真核细胞中表达及抗E2蛋白单克隆抗体的制备
利用DNA重组技术将猪瘟病毒(CSFV)石门株囊膜蛋白E2基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro中构建重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2,该重组逆转录病毒载体与pVSVg质粒经磷酸钙共转染法转入293T细胞中包装逆转录病毒假病毒.用包装的假病毒感染SP2/0细胞,经嘌呤霉素筛选阳性细胞后进行流式细胞术(FACS)分析,结果表明CSFV E2基因在SP2/0细胞膜上成功表达.将表达E2蛋白的SP2/0细胞腹腔免疫BALB/c小鼠,成功诱导小鼠产生了抗E2蛋白的抗体.取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经克隆和筛选获得了4株稳定分泌抗猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗可与CSFV产生特异性反应并具有中和活性.
猪瘟病毒、E2囊膜蛋白、逆转录病毒载体、假病毒、FACS、单克隆抗体
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S852.65+1;Q786(动物医学(兽医学))
中国科学院资助项目30270988
2006-01-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1318-1322