10.3321/j.issn:0366-6964.2004.06.015
口蹄疫病毒VP1基因C末端串连表达及其抗体ELISA方法的初步建立
口蹄疫病毒主要免疫原性基因VP1的B细胞和T细胞抗原表位位于其C末端,参照Taiwanse97(AJ294928)设计了1对特异性引物,扩增出VP1基因C末端.序列分析表明:其C末端长285 bp,编码74个氨基酸,与O/HKN/12/91、O/PEN/TAW/99核苷酸和氨基酸同源性分别为95%、93%和96%、93%;利用同尾酶Xho Ⅰ、Sa Ⅰ将VP1基因C末端串连起来;再将单拷贝和双拷贝C末端基因插入到原核表达载体pGEX-KG后,转化BL21(DE3),在IPTG诱导下获得表达,经Western blot检测证实表达产物具有活性.以表达产物包被ELISA板,初步建立了特异、敏感的ELISA诊断方法.同时用表达产物免疫Balb/c小鼠,能产生一定的抗O型口蹄疫病毒的抗体.
口蹄疫、抗原表位、原核表达、免疫原性
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S852.659.6(动物医学(兽医学))
国家高技术研究发展计划863计划2001 AA 213051;湖北省武汉市科技攻关项目20026002082
2005-03-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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