10.3321/j.issn:0366-6964.2004.05.001
猪原始生殖嵴细胞(PGCs)建系因素的研究
从五指山猪(WSZP)近交系第8~13代培育群中,先后选用21头5~10月龄青年母猪,分别于授精后25~30 d采集胎儿106个, 进行原始生殖嵴(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究.以DMEM+F10(1:1)为基础培养液,按添加或不添加生长因子,将培养液分为A、B、C 3种,并以STO细胞作饲养层,在38℃、5.0% CO2和湿润的气相中进行培养建系.结果获得胚胎生殖嵴细胞(EG)细胞系6个细胞株,其中1个EG细胞株传至11代、2个传至5代、1个传至4代、2个传至3代冻存.并进行了AKP染色、体外分化、冷冻-解冻复苏和嵌合体制作等鉴定研究.研究发现:不同胚龄对EG细胞建系具有一定影响,不同培养液对EG细胞建系效果不同,STO细胞饲养层的质量是建株、传代、冷冻-解冻复苏的关键因素之一.EG细胞系的初步建立,为今后筛选进入种系的EG细胞系、实施体外基因操作提供了可能.
嵌合体、囊胚、近交系猪、原始生殖嵴细胞
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S828.3(家畜)
国家自然科学基金39993430;国家高技术研究发展计划863计划2003AA205100
2004-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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