猪轮状病毒地方株JL94株VP6基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

以猪轮状病毒地方分离株JL94株病毒核酸为模板,通过RT-PCR扩增内衣壳蛋白基因VP6 cDNA,将其插入克隆载体质粒pMD18-T,并进行测序.从T载体上将VP6基因亚克隆到表达载体质粒pET-30a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并利用Ni2+金属螯合亲合层析纯化融合蛋白.结果表明,VP6基因全长1 356bp,并在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量可占菌体蛋白的26.5%,在表达的蛋白中,除45ku主要蛋白外,还有几条分子量较小的蛋白表达出来,这些融合蛋白经纯化后均具有良好的反应特异性.

关键词：猪、轮状病毒、VP6基因、克隆、表达、纯化

所属期刊栏目：35

分类号：S852.65+.9.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：黑龙江省科技攻关项目GC01B510

在线出版日期：2004-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：443-448