10.3321/j.issn:0366-6964.2004.01.025
口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC在大肠杆菌中的高效表达
将牛源O型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)China/99株非结构蛋白基因3ABC从pGEM-T-3ABC重组质粒中亚克隆到原核表达载体pTriEx-4Neo上,成功构建重组表达质粒pTriEx-3ABC.将其转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中表达,表达产物经SDS-PAGE可检测到分子量约为59.1 ku的目的蛋白带,经薄层扫描分析,目的蛋白占菌体总蛋白的31.4%.Western blotting分析证明表达产物能被FMDV阳性血清所识别.表达产物纯化后作抗原进行ELISA检测,结果表明,表达的蛋白显示特异的免疫学活性,并能区分自然感染动物和注苗动物.研究为以FMDV非结构蛋白为抗原,建立自然感染动物和注苗动物的鉴别诊断方法提供了材料.
FMDV、3ABC基因、表达、鉴别诊断
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S852.655(动物医学(兽医学))
国家重点基础研究发展计划973计划G19990119011;甘肃省科技攻关项目GS993-A41-025;中国农业科学院院长基金0028-16;科技部社会公益研究专项基金;国家科技攻关项目2002BA514A-18-1
2004-03-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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