套式PCR检测奶牛粪便中隐孢子虫

摘要：

为了检测样品中的微量隐孢子虫,从含有不同数量隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中,直接提取DNA用作初始PCR(Initial-PCR)模板,以稀释的初始PCR的产物为模板进行套式PCR(Nested-PCR),用两对人工合成寡核苷酸分别作为两PCR的引物,扩增大小分别为540pb、258pb的特异片段.PCR产物经电泳鉴定,可从阳性粪便标本DNA抽提物中扩增出目的片段,而阴性对照不能扩增目的片段;初始PCR、套式PCR的敏感小生最低可分别检测到含卵囊100、5个/g粪便.初步应用结果表明某奶牛场的奶牛自然感染率为16.4%.试验表明套式PCR的敏感性比普通PCR约高100倍,能用于奶牛隐孢子虫感染情况的调查.

关键词：套式PCR、隐孢子虫、粪便

所属期刊栏目：33

分类号：S852.73(动物医学（兽医学）)

资助基金：上海市科技兴农科技攻关项目99-5-3

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：582-584