猪生长激素基因在昆虫细胞中的分泌表达

摘要：

将PCR扩增得到的pGH基因插入到带有polh启动子和gp67强信号肽序列的杆状病毒转移载体pAcGP67-A中,构建重组质粒pGP67￣pGH,并与线性化致死缺失型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(AcMNPV-OCC-)基因组DNA共转染Sf9细胞,构建出重组病毒AcMNPV-pGP67-pGH-OCC-.感染重组病毒的Hi5细胞的表达产物的SDS-PAGE和Western blot结果表明,细胞可溶蛋白和培养液上清中均有一条分子量约为22kDa的猪生长激素特异性反应带,且培养液上清中的目的蛋白分子量比天然pGH略大一些.薄层扫描仪扫描估测可知,重组pGH分别占细胞可溶蛋白的8.98%和培养液上清总蛋白的3.61%.将表达96 h的培养液上清浓缩液进行N-糖基化分析,结果显示重组pGH无N-糖基化加工修饰.

关键词：猪生长激素、杆状病毒表达载体系统、基因表达、N-糖基化分析

所属期刊栏目：33

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：482-485