牛生长激素释放因子类似物基因的克隆与表达

摘要：

本研究以近期报道的高生物学活性、高代谢稳定性的牛生长激素释放因子类似物(Ile2,Ala15,Leu27)bGRF(1-29)-NH2的氨基酸序列为模板,选用大肠杆菌高效表达所偏爱的密码子设计出该基因的全序列.采用化学合成法合成两个3′末端有19碱基互补的80碱基的寡核苷酸片段.并互为模板和引物,通过酶促延伸合成完整的bGRF类似物基因,克隆于pT7 Blue T-Vector中,通过蓝/白筛选和酶切分析确定了阳性克隆.然后将目的基因从pT7 Blue T-Vector克隆于pUC18载体中,以便多拷贝基因的制备.通过测序证明我们获得了目的克隆.将目的基因首尾串联,制备得到的16拷贝基因在温控启动子PRPL调控下于大肠杆菌中获得表达.

关键词：bGRF类似物基因、化学合成、克隆、表达

所属期刊栏目：31

分类号：S813(普通畜牧学)

资助基金：山东省科技厅资助项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：296-300