鸡毒支原体PCR检测及特异扩增片断的克隆与测序

摘要：

根据E.R.Nascimento等从鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepricum,MG)基因文库分离的种特异性片段fMG-2序列,设计合成一对长25bp的引物L1R1,经PCR反应条件优化选择,对5株MG DNA扩增均产生出预期的732bp特异扩增片断,而不能扩增滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)、E.coli、PUC19质粒DNA,符合设计要求;DIG随机引物法标记扩增产物制成DNA探针,与上述菌株DNA Dot-blot杂交,MG呈阳性,其它为阴性;将扩增产物克隆于pGEM-T载体,经EcoRI和RsaI酶切,证实克隆片段与目的DNA大小及酶切位点相同;测序结果表明扩增片段与fMG-2靶序列同源性达97.2%,与已发表的DNA序列无明显同源性.说明所建PCR方法种特异性强,特异扩增片段克隆成功.

关键词：MG、PCR、克隆、测序

所属期刊栏目：31

分类号：S85(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：49-55