抗破伤风毒素中和单克隆抗体筛选及重组表达

摘要：

目的 制备结合不同破伤风类毒素区域的中和性鼠源单抗,并对其进行人源化.方法 首先,破伤风类毒素免疫BALB/c小鼠、细胞融合及筛选后,ELISA法和小鼠中和保护实验检测阳性杂交瘤细胞株表达上清,获得4个具有中和活性的单抗.其次,采用ELISA法确定它们结合位点的竞争关系,并用重组表达的Trx-HCC为抗原对其结合区域定位.最后,将其中2个单抗进行人源化、在CHO细胞中重组表达、纯化和测定中和活性.结果 筛选出4株无相互竞争关系的中和活性单克隆抗体,分别命名为S3A4、9-7A4、9-8C7和S1D2;它们的中和效价分别为52IU/ml、53IU/ml、58IU/ml和60IU/ml,9-7A4和9-8C7特异性结合HCC段,而S3A4和S1D2特异性结合非HCC段,9-7A4和S3A4其人源化后的表达产物效价分别为38IU/mg和35IU/mg,两者混合使用时,其效价可达70IU/mg.结论 获得2株人源化具有中和活性的抗破伤风毒素单克隆抗体,为破伤风药物治疗或疫苗效价检测等奠定了基础.

关键词：免疫、破伤风、中和性单抗、人源化

所属期刊栏目：53

分类号：R436.1

在线出版日期：2023-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：814-821