氢饱和生理盐水对重症急性胰腺炎大鼠肾损伤的保护机制

摘要：

目的 探讨氢饱和生理盐水(H RS)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾损伤的保护机制.方法 采用实验研究方法.将72只大鼠采用随机数字表,分为假手术(SO)组、SAP组、HRS组3组,每组24只.SO组大鼠开腹,仅翻动胰十二指肠后关闭腹腔.SAP组和HRS组大鼠经胰胆管逆行注射5％牛磺胆酸钠(l mL/kg),制备SAP模型.SO组和SAP组大鼠造模成功后5 min,经尾静脉注射普通生理盐水(6 mL/kg),并皮下注射普通生理盐水(20 mL/kg)补液;HRS组大鼠经尾静脉注射HRS(6 mL/kg),并皮下注射HRS(20 mL/kg)补液.处理后3、12、24 h分批处死大鼠,每个时相点8只.(1)检测血清Cr、BUN、IL-1β、IL-6水平和肾脏组织中髓过氧化物酶(MPO).(2)对肾损伤进行病理学分级.(3)采用免疫组织化学染色检测肾脏组织中3-硝基酪氨酸及核因子-κB (NF-κB).(4)采用Western blot法检测肾脏组织中核因子-κB抑制因子(IκB)、TNF-α蛋白.正态分布的计量资料以-x±s表示,成组设计的多个样本均数比较采用重复测量的方差分析,两组间比较采用t检验.计数资料比较采用x2检验.结果 (1)SO组、SAP组、HRS组大鼠血清Cr在处理后3h分别为(30±6)μmol/L、(51 ±8) μmol/L、(46 ±5) μmol/L,12 h分别为(32±6)μmol/L、(80±10) μmol/L、(42±7)μmol/L,24 h分别为(28±5)μmol/L、(100±11) μmol/L、(58±12) μmol/L.SO组、SAP组、HRS组大鼠血清BUN在处理后3h分别为(5.1±0.6)mmol/L、(9.0±1.1) mmol/L、(8.1±1.3)mmol/L,12 h分别为(5.0±0.7)mmol/L、(14.9±2.9)mmol/L、(8.4±1.2) mmol/L,24 h分别为(4.6±1.0) mmol/L、(22.6±1.9) mmol/L、(13.7 ±2.6)mmol/L.SO组、SAP组、HRS组大鼠血清IL-1β在处理后3h分别为(71±9)pg/mL、(192±11) pg/mL、(126±19) pg/mL,12 h分别为(67±11) pg/mL、(279±18) pg/mL、(170±16) pg/mL,24 h分别为(72±12) pg/mL、(322±24) pg/mL、(203±30) pg/mL.SO组、SAP组、HRS组大鼠血清IL-6在处理后3h分别为(121±9)pg/mL、(249±26) pg/mL、(153±16) pg/mL,12h分别为(114±19) pg/mL、(408±23) pg/mL、(252±21) pg/mL,24 h分别为(118±10) pg/mL、(452±29) pg/mL、(285±26) pg/mL.SO组、SAP组、HRS组大鼠肾脏组织MPO在处理后3h分别为(0.44 ±0.04) U/g、(0.79±0.08) U/g、(0.56±0.05) U/g,12 h分别为(0.49±0.07) U/g、(1.45±0.10)U/g、(0.84±0.06) U/g,24 h分别为(0.48±0.07) U/g、(1.85±0.20) U/g、(1.21±0.05) U/g.SO组、SAP组、HRS组大鼠血清Cr在处理后不同时相点(3、12、24 h)比较,差异均有统计学意义(F=23.013,84.858,109.080,P＜0.05);BUN在处理后不同时相点(3、12、24 h)比较,差异均有统计学意义(F=32.830,59.338,205.494,P＜0.05);IL-1β在处理后不同时相点(3、12、24 h)比较,差异均有统计学意义(F=156.462,384.787,231.659,P＜0.05);IL-6在处理后不同时相点(3、12、24h)比较,差异均有统计学意义(F=105.129,309.131,413.937,P＜0.05);肾脏组织MPO水平在处理后不同时相点(3、12、24 h)比较,差异均有统计学意义(F=72.305,658.698,237.924,P＜0.05).①大鼠血清IL-1β水平:处理后3、12、24 h SAP组与SO组比较,差异均有统计学意义(t=24.500,28.140,26.150,P＜0.05);HRS组与SO组比较,差异均有统计学意义(t=7.399,15.000,11.470,P＜0.05);HRS组与SAP组比较,差异均有统计学意义(t=8.519,12.620,8.570,P＜0.05).②大鼠血清IL-6水平:处理后3、12、24 h SAP组与SO组比较,差异均有统计学意义(t=24.080,28.425,26.352,P＜0.05);HRS组与SO组比较,差异均有统计学意义(t=4.930,11.086,16.956,P＜0.05);HRS组与SAP组比较,差异均有统计学意义(=8.811,14.370,12.220,P ＜0.05).③肾脏组织MPO水平:处理后3、12、24 h SAP组与SO组比较,差异均有统计学意义(t=11.070,22.240,18.290,P＜0.05);HRS组与SO组比较,差异均有统计学意义(=5.301,10.738,24.000,P＜0.05);HRS组与SAP组比较,差异均有统计学意义(t=6.895,14.790,8.781,P＜0.05).(2)SO组大鼠处理后12h肾损伤病理学分级0、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级分别为8、0、0、0只,SAP组分别为0、0、3、5只,HRS组分别为0、2、6、0只,3组比较,差异有统计学意义(x2=19.957,P＜0.05).SAP组、HRS组分别与SO组比较,差异均有统计学意义(x2=13.472,13.714,P＜0.05);HRS组与SAP组比较,差异有统计学意义(x2=7.361,P ＜0.05).(3)免疫组织化学染色检测结果显示:SO组大鼠肾脏组织中3-硝基酪氨酸阳性表达量为0.001 0±0.0003,SAP组为0.053 0±0.012 0,HRS组为0.015 0±0.005 0,3组比较,差异有统计学意义(F=128.452,P＜0.05).SAP组、HRS组分别与SO组比较,差异均有统计学意义(t=13.699,8.838,P＜0.05);HRS组与SAP组比较,差异有统计学意义(t=9.244,P＜0.05).SO组大鼠肾脏组织中NF-κB阳性表达量为0.003 0±0.001 5,SAP组为0.491 0 ±0.108 0,HRS组为0.170 0±0.042 0,3组比较,差异有统计学意义(F=138.726,P＜0.05).SAP组、HRS组分别与SO组比较,差异均有统计学意义(t=14.367,12.769,P＜0.05);HRS组与SAP组比较,差异有统计学意义(t=8.760,P＜0.05).(4)Westernblot检测结果显示:处理后12 h SO组大鼠肾脏组织中IκB相对表达量为0.816±0.153,TNF-α相对表达量为0.124±0.033;SAP组分别为0.030±0.009和0.959 ±0.113;HRS组分别为0.404±0.090和0.523±0.094.3组大鼠肾脏组织中IκB、TNF-α相对表达量比较,差异均有统计学意义(F =44.037,69.172,P＜0.05).SAP组、HRS组IκB相对表达量分别与SO组比较,差异均有统计学意义(t=8.883,4.020,P＜0.05);HRS组与SAP组比较,差异有统计学意义(t=7.162,P＜0.05).SAP组、HRS组TNF-α相对表达量分别与SO组比较,差异均有统计学意义(t=12.286,6.937,P＜0.05);HRS组与SAP组比较,差异有统计学意义(t =5.138,P＜0.05).结论 HRS对SAP肾损伤的保护机制可能与其清除自由基,抑制IκB的硝基化、降解,以及抑制NF-κB的激活,从而减少下游炎症因子产生有关.

关键词：重症急性胰腺炎、肾损伤、氢饱和生理盐水

所属期刊栏目：15

分类号：R737.33;R699.2;R587.1

在线出版日期：2016-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：715-722