白细胞介素17通过促进上皮间质转化调控胃癌细胞迁移侵袭能力

摘要：

目的 探讨IL-17对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)和侵袭迁移的影响及其可能作用机制.方法 (1)取对数生长期的胃癌细胞株MGC-803,分别运用浓度为0、1 ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL、1 μg/mL IL-17干预48 h,观察细胞形态学变化.取细胞形态变化最为明显的浓度作为后续实验最适浓度.浓度为100 ng/mL的IL-17干预胃癌细胞48h,设为实验组;加入等量PBS干预胃癌细胞48 h,设为对照组.(2) RT-PCR检测两组胃癌细胞中钙粘附蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的RNA表达水平.(3) Western blot检测两组胃癌细胞中E-cadherin和Vimentin的相对蛋白表达量.(4)划痕实验和Transwell实验检测两组胃癌细胞的侵袭和迁移能力.正态分布的计量资料采用-x±s表示,两组比较采用t检验.结果 (1)胃癌细胞EMT形态变化:不同浓度IL-17处理MGC-803胃癌细胞48 h后,细胞形态发生显著改变.主要是细胞由多角紧密连接状态逐渐向连接松散,梭形形态转变,细胞粘附能力明显下降,且随着IL-17浓度从0增加至100 ng/mL时,细胞形态改变逐渐明显;当浓度达到100 ng/mL时,细胞形态改变最明显;但当IL-17浓度继续增加至1μg/mL时,细胞形态改变不再显著,部分细胞出现死亡,漂浮现象.(2) RT-PCR检测结果:实验组和对照组胃癌细胞中E-cadherin mRNA相对表达量分别为0.45 ±0.13和1.06±0.23;Vimentin mRNA相对表达量分别为2.39 ±0.55和1.23 ±0.41,上述指标两组比较,差异均有统计学意义(t=3.811,2.923,P＜0.05).(3)Western blot检测结果:实验组和对照组胃癌细胞中E-cadherin蛋白相对表达量分别为0.86 ±0.17和1.56±0.29;Vimentin蛋白相对表达量分别为1.01 ±0.12和0.56±0.17,上述指标两组比较,差异均有统计学意义(t=3.551,3.601,P＜0.05).(4)划痕实验结果显示:划痕36 h后,实验组和对照组胃癌细胞均发生了迁移,其划痕宽度分别为(0.76±0.13) mm和(0.40 ±0.15)mm,两组比较,差异有统计学意义(t=3.095,P＜0.05).Transwell法检测结果显示:实验组和对照组穿膜细胞数计数为(159±28)个和(94±18)个,两组比较,差异有统计学意义(t=3.307,P＜0.05).结论 IL-17通过促进胃癌细胞发生EMT转变,进而增强胃癌细胞迁移侵袭能力.

关键词：胃肿瘤、白细胞介素17、上皮间质转化、迁移、侵袭

所属期刊栏目：14

分类号：R735.2;R5;R318

资助基金：国家自然科学基金81372559

在线出版日期：2015-12-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：948-952