BRAF激活的长链非编码RNA在结直肠癌中的表达及功能

摘要：

目的 探讨BRAF激活的长链非编码RNA(BANCR)在结直肠癌中的表达,以及对结直肠癌HCT116细胞生物学功能的影响.方法 收集2012年3月至2013年6月南京医科大学第一附属医院56例结直肠癌手术切除标本(包括癌组织和癌旁组织),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测56例标本中BANCR的表达情况(BANCR高表达组28例、BANCR低表达组28例),并分析其表达水平与临床病理因素的关系;用慢病毒介导shRNA-1和shRNA-2分别干扰HCT116细胞BANCR表达后,将HCT116细胞分为4组:干扰组1(转染慢病毒载体携带LV-shRNA-1)、干扰组2(转染慢病毒载体携带LV-shRNA-2)、阴性对照组(转染无意义序列的重组慢病毒载体)和空白组(仅以RPMI 1640培养基培养),分别采用CCK-8法、流式细胞法和Transwell法检测各组细胞增殖、凋亡和迁移的能力.计量资料以x ±s表示,两组间比较采用u检验,多组间均数比较采用单因素方差分析和重复测量的方差分析,两两比较采用LSD-t检验,多因素分析采用二元Logistic回归模型,分类资料采用x2检验.结果 qRT-PCR检测结果显示:56例结直肠癌组织中BANCR相对表达量为1.6±0.4,高于癌旁组织的0.9±0.7,两者比较,差异有统计学意义(u=1 020.000,P＜0.05).单因素分析结果显示:BANCR的高表达与淋巴结转移、肿瘤分期相关(x2=4.595,7.487,P＜0.05).多因素分析结果显示:淋巴结转移和肿瘤分期Ⅲ～Ⅳ期是影响BANCR高表达的独立危险因素(OR=4.000,5.914,95％可信区间:1.230 ～ 12.900,1.685 ～ 20.760,P＜0.05).qRT-PCR检测结果显示:干扰组1、干扰组2、阴性对照组、空白组细胞中BANCR相对表达量分别为0.25 ±0.04、0.20 ±0.06、0.96 ±0.04、0.98 ±0.03,4组比较,差异有统计学意义(F=271.610,P＜0.05).CCK-8法检测结果显示:各组细胞培养至第6天,干扰组1、干扰组2、阴性对照组的细胞增殖率分别为80.6％±7.6％、81.2％±5.1％、87.9％±13.6％,3组比较,差异无统计学意义(F =0.559,P＞0.05).流式细胞仪检测各组细胞凋亡结果显示:干扰组1、干扰组2、阴性对照组、空白组的细胞凋亡率分别为4.7％±1.7％、5.1％±1.1％、3.1％±0.6％、2.8％±0.9％,4组比较,差异无统计学意义(F =2.881,P＞0.05).Transwell法检测结果显示:干扰组1、干扰组2、阴性对照组、空白组的穿膜细胞数为(135 ±29)个、(107 ±18)个、(240±24)个、(245 ±22)个,4组比较,差异有统计学意义(F =45.194,P＜0.05).结论 BANCR在结直肠癌组织中高表达,其高表达与淋巴结转移和肿瘤分期相关.BANCR能促进HCT116细胞迁移,可能成为结直肠癌诊断和判断预后的重要分子标志物.

关键词：结肠肿瘤、直肠肿瘤、长链非编码RNA、HCT116细胞、迁移

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资助基金：国家重大科学仪器设备开发专项2012YQ030261

在线出版日期：2014-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：376-380