体外富集Treg细胞对CTL杀伤MNK45胃癌细胞活性的影响及机制研究

摘要：

目的体外分析CD4+CD25+Treg(regulatory T cells)细胞对CD8+CTL(cytotoxic T lymphocytes)细胞杀伤MNK45胃癌细胞株活性的影响及机制.方法通过T细胞纯化柱分选小鼠脾细胞悬液T淋巴细胞,以MACS单阳性和双阳性分选法分别富集CD4+CD25+Treg细胞和CD8+CTL;通过不同浓度CD8+CTL与MNK45胃癌细胞混合培养,筛选有效杀瘤体外培养体系.通过TransWell分隔培养和混合培养的方式向CTL与MNK45胃癌细胞株组成的体外抗肿瘤培养体系中加入CD4+CD25+Treg细胞,以瑞氏染色显微计数的方法观察Treg细胞对CTL杀伤MNK45胃癌细胞活性的影响,结合ELISA法检测各体系穿孔素浓度,分析影响活性的细胞及免疫学机制.结果质量浓度为2.0×105/ml的CTL与1.0×105/ml MNK45胃癌细胞混合培养,CTL能对MNK45胃癌细胞形成明显的杀伤作用(P《0.01);在此培养体系中以混合培养的方式加入质量浓度为5.0×104/ml CD4+CD25+Treg细胞即可明显抑制培养体系中CTL对肿瘤细胞的杀伤作用;如以TransWell分隔培养的方式将CD4+CD25+Treg细胞与抗肿瘤培养体系分隔培养,达到同样抑制效能(实验组死亡肿瘤细胞百分率与对照组比较,P《0.05)的CD4+CD25+Treg细胞浓度须≥2.0×105/ml.结论 CD4+CD25+Treg细胞能够对CTL杀伤MNK45胃癌细胞株的活性形成明显抑制, 在Treg细胞与CTL作用的相应细胞和免疫学机制中, 细胞接触机制占主导地位.

关键词：胃肿瘤、调节性T细胞、细胞毒性T淋巴细胞、MNK45胃癌细胞株

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分类号：R735.2;R73-36+2(肿瘤学)

资助基金：中国科学院资助项目30200264;教育部科学技术研究项目3993430-2

在线出版日期：2006-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：197-200