反义人端粒酶RNA组分基因对胃癌细胞端粒酶活性的影响

摘要：

目的克隆人胃癌细胞端粒酶RNA组分(hTR)基因片段并构建其正义和反义真核表达载体,研究反义端粒酶RNA对人胃癌细胞株MKN-45端粒酶活性的影响.方法采用RT-PCR方法从人胃癌细胞株MKN-45中扩增出人hTR部分cDNA序列,将该片段分别正向和反向插入PEF6/V5-His-TOPO载体后构建人端粒酶RNA组分(hTR)基因正、反义真核表达载体,随后采用脂质体转染法将该正、反义载体转染入人胃癌细胞株MKN-45,用TRAP法观察后者端粒酶活性的改变.结果所克隆的基因片段其碱基序列与文献报导完全一致,且插入载体的方向完全正确.与正常对照、转染正义载体、空载体者比较,转染反义载体者端粒酶活性显著下降.结论本实验已成功克隆了人端粒酶RNA组分(hTR)基因的部分序列并成功构建hTR正反义真核表达载体,而且反义端粒酶RNA能有效降低人胃癌细胞株MKN-45端粒酶活性.

关键词：端粒酶、人端粒酶RNA组分、真核表达载体、反义核酸

所属期刊栏目：1

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金39770725

在线出版日期：2004-02-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：185-189