重组腺病毒载体敲减ApoE-/-小鼠血管平滑肌细胞Orai1基因模型的构建

摘要：

目的:为探讨Orai1基因在动脉粥样硬化进展中的作用,通过重组腺病毒载体建立ApoE-/-小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs) Orai1基因的敲低模型,为深入相关研究奠定基础.方法:构建针对小鼠Orai1基因的重组腺病毒载体.高脂饲养ApoE-/-小鼠至16周龄后处死.取胸主动脉原代VSMCs改为体外培养,细胞分为三组,分别为shOrai1组、shNC组和对照组.转染后通过实时定量聚合酶链式反应(qPCR),Western blot检测Orai1表达水平,同时对转染模型进行验证.结果:qPCR示,重组腺病毒在ApoE-/-小鼠VSMCs中Orai1基因的干扰效率达57％,Western blot结果示,Ad-GFP-Orial-shRNA转染组Orai1蛋白表达水平显著降低.结论:通过成功建立ApoE-/-小鼠VSMCs中Orai1基因敲低模型,从而为阐明钙库操纵性钙通道在动脉粥样硬化进程中的作用,尤其关于斑块延展和不稳定的相关性研究莫定了基础.

关键词：Orai1基因、动脉粥样硬化、核糖核酸干扰、血管平滑肌细胞

所属期刊栏目：40

分类号：R54(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：2020年北京自然科学基金7202039

在线出版日期：2021-05-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：281-286