10.3969/j.issn.1007-5062.2019.05.022
转录因子c-Jun对人血管平滑肌细胞中线粒体融合基因2表达调控作用的实验研究
目的:探讨转录因子c-Jun对培养的人血管平滑肌细胞(hVSMCs)中线粒体融合基因2(Mfn2)表达的调控作用.方法:①siRNA干扰实验:设正常对照组、阴性siRNA对照组和siRNA干扰组,用c-Jun siRNA转染hVSMCs,培养26 h后提取细胞mRNA和总蛋白.通过RT-PCR和Western blot检测Mfn2基因和蛋白质的表达.②过表达实验:设正常对照组、阴性病毒对照组和慢病毒过表达组.用慢病毒载体感染细胞,培养96 h后提取细胞mRNA和总蛋白.通过RT-PCR和Westem blot检测Mfn2基因和蛋白质的表达.结果:siRNA敲减c-Jun后,与阴性siRNA对照和正常对照组相比,siRNA干扰组Mfn2 mRNA明显降低[(0.671±0.061) vs.(1.110:±:0.080),P<0.01;(0.671:±0.061) vs.(1.000±0),P<0.01],蛋白质的表达也显著降低[(0.571±0.049) vs.(1.042±0.039),P<0.01;(0.571±0.049)vs.(1.000±0),P<0.01],hVSMCs的数量明显增加.相反,用慢病毒表达载体过表达c-Jun后,与阴性病毒对照和正常对照组相比,慢病毒过表达组Mfn2 mRNA明显增加[(1.414±0.063) vs.(1.056±0.020),P<0.01;(1.414±0.063) vs.(1.000±0),P<0.01],蛋白质的表达也显著增加[(1.449±0.044) vs.(1.089±0.026),P<0.01;(1.449±0.044) vs.(1.000±0),P<0.01],hVSMCs的数量则明显下降.结论:c-Jun能显著正调控Mfn2的表达,并影响hVSMCs的增殖.因此,它可能是Mfn2表达的转录调控因子.
线粒体融合基因2、c-Jun、转录因子、转录调控、血管平滑肌细胞
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R54(心脏、血管(循环系)疾病)
国家自然科学基金81370229,81270216,81870335;北京市自然科学基金7102045;北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养计划2014-3-040
2019-07-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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