大麻素2型受体对癫痫持续状态大鼠海马CA1区自噬相关蛋白LC3、Beclin-1表达的影响
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10. 3760/cma. j. issn. 1673-4912. 2019. 07. 002

大麻素2型受体对癫痫持续状态大鼠海马CA1区自噬相关蛋白LC3、Beclin-1表达的影响

引用
目的 建立癫痫持续状态( status epilepticus,SE)大鼠模型,探讨大麻素2型受体( canna-binoid receptor type 2,CB2R)对自噬相关蛋白LC3、Beclin-1 表达的影响.方法 SD大鼠随机分为4组:对照组,癫痫组( Epilepsy 组),CB2R 激动剂 JWH-133 组( Epilepsy +JWH-133 组),CB2R 拮抗剂AM630组(Epilepsy+AM630组).采用腹腔注射氯化锂-匹鲁卡品的方法建立SE模型.匹鲁卡品腹腔注射前1 h各组大鼠经侧脑室注射等量不同药物,对照组及Epilepsy组注射二甲基亚砜,Epilepsy+JWH-133组注射JWH-133,Epilepsy+AM630组注射AM630,在SE后24 h,观察各组大鼠癫痫症状学表现,采用HE 染色观察各组大鼠海马CA1 区神经元数量变化,应用双重免疫荧光和Western blot技术检测各组大鼠海马CA1区自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达的变化.结果 大鼠癫痫症状学观察显示:对照组无明显癫痫发作,Epilepsy组大鼠的抽搐潜伏期为(13. 50 ± 0. 61) min,抽搐强度评分为(4. 33 ± 0. 47)分;Epilepsy+JWH-133 组的抽搐潜伏期为( 19. 33 ± 0. 42 ) min,较 Epilepsy 组明显延长( P <0. 05);Epilepsy+JWH-133抽搐强度评分为(3. 33 ± 0. 59)分,较Epilepsy组低(P<0. 05),而Epilepsy+AM630组的作用正好相反. HE染色结果显示:Epilepsy组大鼠海马CA1 区神经元数量明显减少,与Epilepsy组相比,Epilepsy+JWH-133组神经元数量明显增多(P<0. 05),而Epilepsy+AM630组神经元数量明显减少(P<0. 05).免疫荧光及蛋白印迹结果显示:LC3和Beclin-1主要表达在神经元,Epilepsy组大鼠各组LC3和Beclin-1的表达均比对照组升高(P<0. 05),与Epilepsy组相比,Epilepsy+JWH-133组LC3和Beclin-1的表达升高更明显( P<0. 05),而Epilepsy+AM630组的LC3和Beclin-1的表达降低(P<0. 05).结论 在SE后神经元损伤修复的早期阶段CB2R对海马神经元的自噬活动可能产生影响,暗示CB2R可能成为癫痫治疗的一个潜在靶点.

癫痫持续状态、海马、2型大麻素受体、自噬、LC3、Beclin-1

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国家重点研发计划课题2016YFC1306203 Fund program: The National Key Research and Development Program of China2016YFC1306203

2019-08-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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