静脉注入胆红素对新生大鼠脾髓样分化因子88和白细胞介素1受体相关激酶-4蛋白表达的影响

摘要：

目的：建立新生大鼠高胆红素血症模型,探讨静脉注入胆红素对脾髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)和白细胞介素1受体相关激酶-4(interleukin-1 receptor associ-ated kinase-4,IRAK-4)蛋白表达的影响。方法选用清洁级7~8 d 新生 SD 大鼠,雌雄不限,体重12.0~15.0 g,采用随机抽签法随机分为空白对照组(Ⅰ)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对照组(Ⅱ)、15 mg /kg 胆红素对照组(Ⅲ)、15 mg /kg 胆红素＋LPS 组(Ⅳa)、30 mg /kg 胆红素＋LPS 组(Ⅳb)和50 mg /kg胆红素＋LPS 组(Ⅳc),共6组,每组设置2 h、5 h、24 h 三个时间点,每个时间点8只。颈静脉注射不同剂量胆红素(15 mg /kg、30 mg /kg 和50 mg /kg)建立新生 SD 大鼠高胆红素血症模型,1 h 时腹腔注入 LPS 1 mg /kg。在注入胆红素后2 h、5 h、24 h 取脾脏,采用免疫组织化学法检测脾 MyD88和IRAK-4蛋白的表达。结果(1)LPS 可促进脾细胞 MyD88和 IRAK-4表达(qMyD882 h =49.89,qMyD885 h=139.54,qIRAK-42 h =7.93,qIRAK-45 h =24.30,qIRAK-424 h =6.97,P ＜0.01)。(2)低浓度胆红素单独作用可促进脾细胞 MyD88表达,抑制 IRAK-4表达(qMyD882 h =0.76,qMyD885 h =5.05,qIRAK-42 h =6.43,qIRAK-45 h =22.37,qIRAK-424 h =1.50,P ＜0.01)。(3)低浓度胆红素对 LPS 刺激 MyD88表达的影响不明显(q2 h =1.48,q5 h =1.45,q24 h =0.10,P ＞0.05),中、高浓度胆红素对 LPS 刺激 MyD88表达有抑制作用(qⅣb 2 h =42.87,qⅣc 2 h =51.38,qⅣb 5 h =103.61,qⅣc 5 h =115.44,qⅣb 24 h =1.18,qⅣc 24 h =11.66,P ＜0.01)。(4)低、中、高浓度胆红素对 LPS 刺激 IRAK-4表达均有抑制作用(qⅣa 2 h =9.52,qⅣb 2 h =14.39,qⅣc 2 h =25.55, qⅣa 5 h =38.83,qⅣb 5 h =54.62,qⅣc 5 h =60.51,qⅣa 24 h =2.41,qⅣb 24 h =1.47,qⅣc 24 h =7.61,P ＜0.01)。(5)胆红素对 MyD88、IRAK-4的抑制作用,2 h 时即可观察到,5 h 时作用明显,24 h 时低、中浓度胆红素的抑制作用消失,高浓度胆红素的抑制作用仍然存在(P ＜0.01)。(6)MyD88、IRAK-4表达水平与胆红素浓度呈负相关(rsMyD882 h =-0.86,rsMyD885 h =-0.92,rsMyD8824 h =-0.53,rsIRAK-42 h =-0.82,rsIRAK-45 h =-0.86,rsIRAK-424 h =-0.57,P ＜0.01)。(7)在胆红素和 LPS 作用下,脾细胞 MyD88和 IRAK-4表达水平呈正相关(r2 h =0.77,r5 h =0.9,r24 h =0.67,P ＜0.01)。结论胆红素可抑制 MyD88和 IRAK-4蛋白的表达,浓度越高抑制作用越明显,持续时间越长。提示胆红素影响新生大鼠免疫功能的机制可能与调节 Toll 样受体4信号通路中 MyD88和 IRAK-4的表达有关。

关键词：胆红素、高胆红素血症、脾髓样分化因子88、白细胞介素1受体相关激酶-4、大鼠、新生

分类号：R68;R71

资助基金：四川省科技厅科研基金资助项目05JY029-054-2；07SG004-005

在线出版日期：2015-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：699-703