RhoA-Rock信号通路抑制剂对缺氧人肺微血管内皮细胞丝状肌动蛋白细胞骨架的影响

摘要：

目的 用RhoA-Rock信号通路抑制剂探讨肺出血时肺微血管内皮细胞的调控因素.方法 人肺微血管内皮细胞常规培养,分为4组:对照组、抑制剂组、缺氧组和抑制剂缺氧组.异硫氰酸荧光素-鬼笔环肽与胞浆内丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)结合而发出红色荧光,共聚焦显微镜扫描观察F-actin的变化情况并记录相应荧光值.结果 细胞缺氧组1h、12 h和24h的F-actin平均荧光强度分别为对照组的(64.3±5.5)％、(60.3±4.2)％和(47.8±4.6)％；抑制剂缺氧组1h、12 h和24h分别为对照组的(66.2±3.2)％、(67.1±6.2)％和(72.5±6.1)％.细胞缺氧组缺氧1h后,F-actin平均荧光强度降低[(64.3±5.5)％],与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),至缺氧24h,F-actin含量已下降至对照组的(47.8±4.6)％,差异有统计学意义(P＜0.05).抑制剂缺氧组缺氧1h后,F-actin平均荧光强度较缺氧组1h有所升高,为对照组的(66.2±3.2)％,抑制剂组缺氧24h后F-actin平均荧光强度为对照组的(72.5±6.1)％,与缺氧组缺氧24h相比差异有统计学意义(P＜0.05).而抑制剂组不经缺氧的F-actin平均荧光强度与对照组相比无显著变化(P＞0.05).缺氧后细胞皮质状结构消失,应力纤维排列紊乱,随着缺氧时间的延长,F-actin逐渐解聚断裂.用RhoA-Rock信号通路抑制剂预处理细胞后再缺氧,核周围F-actin所形成的皮质状结构重新出现,细胞浆内应力纤维的排列和分布趋向于规律,F-actin断裂减少.结论 RhoA-Rock信号通路在肺微血管内皮细胞缺氧过程中介导了F-actin的损伤,用RhoA-Rock信号通路抑制剂干预可以为新生儿肺出血的治疗研究提供一个新的方向.

关键词：肺出血、肺微血管内皮细胞、丝状肌动蛋白、RhoA-Rock信号通路、婴儿、新生

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分类号：R4(临床医学)

资助基金：广州医学院青年基金2008 A09;广东省科技计划项目粤科规划字[2010]170号

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：67-70