天冬多糖低氧下抑制肝癌作用的体外实验研究

摘要：

目的 探讨低氧环境下天冬多糖对人肝癌细胞生长的影响及初步作用机制.方法 氯化钴(CoCl2)化学模拟低氧下培养4种人肝癌细胞株(HepG2、Hep3 B、SMMC-7721及Bel-7402),加入不同浓度的天冬多糖(0 mg/mL、0.9 mg/mL、1.2 mg/mL、1.8 mg/mL、2.4 mg/mL、2.7 mg/mL、3.6 mg/mL)培养,CCK-8法检测天冬多糖对4种人肝癌细胞株细胞增殖的影响,根据IC50选取0.9 mg/mL、1.8 mg/mL、2.7 mg/mL作为后续实验的天冬多糖低、中、高剂量浓度.后续实验4种细胞均设6组:常氧对照组只加入培养液培养;低氧对照组加入200μmol/L CoCl2培养;低氧低剂量组加入200μmol/L CoCl2+0.9 mg/mL天冬多糖培养;低氧中剂量组加入200μmol/L CoCl2+1.8 mg/mL天冬多糖培养;低氧高剂量组加入200μmol/L CoCl2+2.7 mg/mL天冬多糖培养;常氧高剂量组加入2.7 mg/mL天冬多糖培养.培养24 h后,Real-time PCR检测各组血管内皮生长因子(VEGF)、Bax、Bcl-2 mRNA表达情况,West-ern-blot方法检测各组缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、VEGF、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Cleaved Caspase-3蛋白表达情况.结果 低氧下天冬多糖可明显抑制人肝癌细胞株的生长,且抑制作用呈剂量依赖性.天冬多糖可明显抑制HIF-1α、VEGF、MMP-9蛋白表达及VEGF mRNA、Bcl-2 mRNA表达,促进Cleaced Caspase-3蛋白及Bax mRNA表达,且低氧下高剂量作用最明显.结论 天冬多糖在体外低氧条件下能抑制肝癌细胞的生长,其可能通过抑制HIF-1α/VEGF表达及肝癌细胞的侵袭、促进肝癌细胞凋亡起到抗肝癌的作用.

关键词：天冬多糖、肝癌细胞、低氧、缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子

所属期刊栏目：28

分类号：R-33(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金资助项目817033868

在线出版日期：2019-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2623-2628