10.3969/j.issn.1008-8849.2015.22
骨髓源性血管内皮祖细胞体外分离、培养及分化为内皮细胞的研究
目的:探讨骨髓源性血管内皮祖细胞(EPCs)在体外分离、培养、诱导分化及鉴定的方法。方法抽取SD大鼠的骨髓细胞,离心法提取骨髓液中单个核细胞,用含有血管内皮细胞生长因子( VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子( bFGF)、表皮细胞生长因子( EGF)的培养液诱导培养EPCs,观察并记录EPCs的生长分化过程;对培养后的细胞进行免疫荧光染色,鉴定细胞表面标志物,同时,RT-PCR法检测EPCs特异性分子标志物。结果培养24 h后细胞开始贴壁,4 d后细胞呈集落样生长,细胞从集落中央向外周生长,至培养的第7天成片生长的细胞集落相互连接,10 d后细胞形态明显改变,呈现典型的“鹅卵石样”外观。贴壁细胞免疫荧光检测显示CD34、CD133、VEGFR-2、FGFR1均阳性,经RT-PCR法检测,EPCs表达的特异性分子标志物均为阳性。结论以梯度离心法获得骨髓单个核细胞经培养后,可扩增出具有典型特征的EPCs,呈贴壁增殖状态且具有分化能力,经体外诱导可分化为成熟的血管内皮细胞。
骨髓、内皮祖细胞、细胞分离、诱导、血管内皮细胞
R-33(医学研究方法)
2015-08-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
2421-2424,2490