10.3969/j.issn.1008-8849.2015.18.003
miR-155抑制HepG2.2.15细胞中乙型肝炎病毒复制与表达的研究
目的:研究人miR-155对HepG2.2.15细胞中乙型肝炎病毒(HBV)的抑制作用,为 miRNAs治疗乙型肝炎提供理论依据。方法以 HepG2.2.15细胞基因组为模板,PCR扩增人 miR-155前体序列,双酶切连接到 pmR-mCherry质粒,构建 pmiR -155真核过表达载体,并转染到 HepG2.2.15细胞。设重组组( pmiR -155质粒)、空载组( pmR -mCherry 质粒)、转染试剂组和空白组。转染后24 h、48 h、72 h,应用实时荧光定量PCR法检测各组 miR-155表达量和 HBV DNA拷贝数,化学发光法定量检测 HBsAg和 HBeAg变化情况。结果实时荧光定量 PCR结果显示,与空白组相比,重组组 miR -155表达量明显提高。化学发光法结果示在转染后48 h,过表达的 miR -155对上清培养液所分泌 HBsAg、HBeAg 抑制作用明显,抑制率分别为(83.96±1.52)%和(79.60±8.71)%。定量PCR检测示过表达的miR-155对HBV DNA拷贝数的抑制率分别为(51.87±0.36)%、(43.67±1.51)%和(68.21±6.02)%。结论 miR -155对 HBV 蛋白的抑制作用具特异性,呈负相关,在体外可抑制 HepG2.2.15细胞中 HBV的复制和表达。
乙型肝炎病毒、miR-155、HepG2. 2. 15 细胞
R-33(医学研究方法)
广州市科技计划项目2013J4100116
2015-07-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
1945-1947