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RNA干扰HDAC1对人乳腺癌MCF-7细胞生物活性的影响

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目的:通过RNA干扰乳腺癌MCF-7细胞组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因,观察对其细胞周期及细胞生长的影响。方法:将乳腺癌MCF-7细胞分成3个组:空白对照组(不予任何处理)、阴性对照组(予以阴性siRNA+脂质体)、siRNA组(HDAC1siRNA+脂质体)。人工合成针对HDAC1基因的小分子干扰RNA构建HDAC1-siRNA重组质粒,通过脂质体转入乳腺癌MCF-7细胞。用Real Time-PCR法和Western-blot法分别检测HDAC1基因的mRNA及蛋白表达情况;MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化。结果:转染24h后人乳腺癌MCF-7细胞中HDAC1mRNA表达量在siRNA组为(0.15±0.02)、空白对照组为(1.00±0.03)、阴性对照组(0.83±0.04)。与空白对照组和阴性对照组相比, siRNA组细胞中HDAC1mRNA表达量下降明显(P<0.05)。Western blot显示HDAC1蛋白表达量亦明显显示:siRNA组表达量比空白和阴性对照组低(P<0.05)。MTT法检测显示3组细胞中,siRNA组的细胞生长速度较其他两组慢(P<0.05)。流式细胞术检测显示3组乳腺癌细胞细胞周期分布显示siRNA组细胞周期S期明显减少(P<0.05),G1期比例增加(P<0.05)。结论:通过RNA干扰能有效的抑制人乳腺癌MCF-7细胞HDAC1的表达,同时抑制细胞增殖、引起细胞周期停滞。

HDAC1、细胞增殖、细胞周期

R73;R39

2015-09-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共3页

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