miR-325-3p靶向CLDN1调控人肝癌细胞增殖、侵袭与迁移

摘要：

目的 探讨微小核糖核酸-325-3p(miR-325-3p)靶向紧密连接蛋白1(CLDN1)调控人肝癌细胞增殖、侵袭与迁移的作用.方法 将对数生长期的人肝癌细胞株SMMC-7721分为四组:阴性对照组、上调组、下调组和正常组.荧光显微镜观察各组细胞转染效率;细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测各组细胞增殖活性;侵袭小室(Transwell)实验检测各组细胞侵袭和迁移活性;实时-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞miR-325-3p、CLDN1、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)信使核糖核酸(mRNA)表达;免疫印迹法(WB)检测各组CLDN1、ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-2蛋白表达及p-ERK1/2水平;双荧光素酶报告基因检测验证miR-325-3p对CLDN1的作用.结果 阴性对照组、上调组和下调组细胞转染效率分别为(91.38±16.21)％、(92.17±15.93)％、(94.12±17.05)％;与正常组、阴性对照组和上调组比,下调组细胞吸光度值上升,增殖抑制率显著下降,侵袭细胞数和迁移细胞数增加,miR-325-3p表达和E-cadherin mRNA和蛋白表达显著下降,CLDN1、N-cadherin、Vimentin、MMP-2 mRNA和蛋白表达上升,ERK1/2 mRNA表达上升,p-ERK1/2水平、p-ERK1/2/ERK1/2水平上升,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);双荧光素酶报告基因实验证实miR-325-3p可靶向调控CLDN1的表达.结论 miR-325-3p可抑制肝癌细胞增殖、侵袭和迁移,可能与靶向CLDN1,抑制ERK1/2表达,促进E-cadherin表达,抑制N-cadherin、Vimentin、MMP-2表达相关.

关键词：微小核糖核酸-325-3p、紧密连接蛋白1、肝癌、增殖、侵袭、迁移

所属期刊栏目：27

分类号：R575(消化系及腹部疾病)

资助基金：河北省卫健委立项课题20220653

在线出版日期：2022-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：852-858