大蒜素通过AKT/NF-κB通路诱导大肠癌细胞凋亡的实验研究

摘要：

目的 探索大蒜素通过丝苏氨酸激酶/核转录因子-κB(AKT/NF-κB)通路对大肠癌细胞凋亡的影响.方法 将大肠癌Lovo细胞分为对照组、大蒜素低、中、高剂量组(大蒜素,20 mg/L、40 mg/L和80 mg/L)和阳性对照组(顺铂,10μmol/L).MTT法检测大蒜素对大肠癌细胞的半抑制浓度(IC50),检测各组细胞增殖;流式细胞仪检测各组细胞周期和凋亡;Western blot检测Akt/NF-κB信号通路、Ki-67、增殖细胞核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、BCL2相关X蛋白(Bax)和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase-3)的表达;将培养细胞分为sh-NC组(空白质粒)、sh-Akt组(质粒转染)、大蒜素组+sh-NC组(终浓度为20 mg/L)、大蒜素组+sh-Akt组(终浓度为20 mg/L),检测转染后各组细胞的增殖、凋亡、蛋白NF-κB p65、p-NF-κB p65、cleaved Caspase-3的表达.结果 大蒜素对大肠癌细胞的抑制作用呈药物浓度依赖性,IC50为(40.27±1.23)mg/L;与对照组相比,大蒜素低、中、高剂量组和阳性对照组的细胞抑制率和凋亡率均明显升高(P<0.05),有丝分裂S期细胞和G2/M期细胞所占比例明显增加(P<0.05),Ki-67、PCNA、Bcl-2/Bax、p-Akt/Akt和p-NF-κB p65/NF-κB p65的表达明显下降(P<0.05),cleaved Caspase-3的表达明显升高(P<0.05),且随着大蒜素剂量的增加,其作用逐渐增强(P<0.05);与sh-NC组相比,sh-Akt组和大蒜素+sh-NC组细胞抑制率和凋亡率明显升高(P<0.05),p-NF-κB p65/NF-κB p65表达明显下降(P<0.05),cleaved Caspase-3表达明显升高(P<0.05);与sh-Akt组相比,大蒜素+sh-Akt组细胞抑制率和凋亡率明显升高(P<0.05),p-NF-κB p65/NF-κB p65表达明显下降(P<0.05),cleaved Caspase-3表达明显升高(P<0.05).结论 大蒜素可能通过抑制Akt/NF-кB信号通路,抑制大肠癌细胞增殖,诱导细胞凋亡.

关键词：大蒜素、丝苏氨酸激酶/核转录因子-κB、大肠癌、细胞凋亡

所属期刊栏目：25

分类号：R755.34;R574(皮肤病学与性病学)

资助基金：北京市卫生和计划生育委员会科研课题计划201840289

在线出版日期：2020-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：193-198