胰腺癌细胞总RNA转染树突细胞诱导特异性CTL能力的体外研究

摘要：

目的：观察人胰腺癌MiaPaCa-2细胞总RNA电转染树突细胞（Dendritic Cell，DC）体外激发抗原特异性细胞毒T淋巴细胞（Cytotoxic T Lymphocyte, CTL）的能力。方法自6例胰腺癌患者外周血单核细胞中分离、培养DC。使用电穿孔法将MiaPaCa-2细胞总RNA体外转录和PCR扩增的MUC1 mRNA转染DC，以未负载抗原的DC为对照。采用实时定量PCR技术检测各组DC中MUC1表达。四甲基偶氮唑盐（MTT）检测转染各组DC存活率变化；混合细胞培养法评价各组DC体外刺激自体T淋巴细胞增殖能力；ELISA法检测各组DC体外激发抗原特异性CTL细胞因子释放量。结果 MiaPaCa-2总RNA与MUC1 mRNA分别转染后48 h DC中目标抗原的相对表达量分别为37.24±3.17和34.53±2.02，两者比较无显著差异（P>0.05）。电转染后96 h MiaPaCa-2总RNA转染组DC存活率降至60.81%，低于MUC1 mRNA单转染时DC的存活率（80%左右）（P<0.05）。转染MiaPaCa-2总RNA DC刺激自体T细胞增殖指数为8432±611.25，显著高于MUC1单独转染组3664±305.17（P<0.05）；且转染MiaPaCa-2总RNA DC激发特异性 CTL分泌IL-2、IL-10、Granzyme B、IFN-γ水平亦显著高于MUC1 mRNA单独转染组（P<0.05）。结论胰腺癌肿瘤细胞总RNA转染的DC较单一胰腺癌相关抗原负载DC有更强的体外抗原特异性CTL激发能力。

关键词：树突细胞、RNA转染、胰腺肿瘤、细胞毒性T淋巴细胞

分类号：R73;R39

资助基金：国家自然科学基金资助项目81071982

在线出版日期：2014-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：307-311