10.3969/j.issn.1672-2159.2011.06.006
RNAi抑制人大肠癌LOVO细胞Bmi-1基因的表达
目的 探讨RNA干扰(RNAi)技术沉默Bmi-1基因表达对人大肠癌细胞株LOVO增殖和侵袭力的影响及机制.方法 将化学法合成的针对Bmi-1 mRNA不同位点设计的3对siRNA序列(siR-NA1~3)和1对带有荧光标记的FAM-siRNA(siRNA4)转染至人大肠癌LOVO细胞,荧光显微镜下观察siRNA的转染效率,QRT-PCR检测Bmi-1 mRNA表达抑制作用,Western Blot检测Bmi-1蛋白表达变化,MTT法检测LOVO细胞体外增殖变化,小室侵袭实验检测LOVO细胞侵袭能力.结果 利用荧光标记的Oligo观察到siRNA转染效率达70%.siRNA1对mRNA表达抑制率最高,从而筛选出沉默效应最强的siRNA序列为siRNA1.siRNA1转染组LOVO细胞Bmi-1蛋白表达,增殖及侵袭力明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05).结论 化学合成的靶向Bmi-1 siRNA转染人大肠癌LOVO细胞能有效抑制Bmi-1的mRNA和蛋白质表达水平,Bmi-1基因的RNA干扰可有效抑制人大肠癌LOVO细胞的增殖和侵袭能力.
大肠癌、Bmi-1、小干扰RNA、细胞增殖、肿瘤浸润
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R73;R58
广东省自然科学基金9151008004000014
2012-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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