骨桥蛋白剪接变体对胶质瘤细胞侵袭性的影响

摘要：

目的 探讨骨桥蛋白(OPN)剪接变体对胶质瘤细胞侵袭性的影响及其作用机制.方法 采用荧光定量聚合酶链反应或逆转录-聚合酶链反应分别检测正常脑组织、WHO Ⅱ～Ⅳ级胶质瘤组织,以及人胶质瘤细胞系U251、U87、SHG44和TJ905骨桥蛋白各剪接变体表达水平;小干扰RNA(siRNA)技术沉默野生型骨桥蛋白,慢病毒质粒表达载体分别导入三种突变型剪接变体OPN-a、OPN-b和OPN-c;细胞体外侵袭实验检测U251和U87细胞体外侵袭力.整合素αvβ3受体抗体和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002抑制骨桥蛋白的作用,阻断PI3K/Akt信号转导通路.Western blotting法检测侵袭相关蛋白尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平,以及丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶AKT磷酸化水平和核因子-κB(NF-κB)p65转录进入细胞核水平,明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9活性.结果 WHOⅢ～Ⅳ级胶质瘤组织,以及U251和U87细胞骨桥蛋白各剪接变体呈高表达,而正常脑组织、WHOⅡ级胶质瘤组织及SHG44和TJ905细胞呈低表达.OPN-a和OPN-c可升高U251和U87细胞AKT磷酸化水平,诱导NF-κB p65转录进入细胞核,提高uPA、MMP-2和MMP-9表达水平,增强MMP-2和MMP-9活性,从而增强胶质瘤细胞侵袭力;OPN-b对胶质瘤细胞侵袭力无明显作用.结论 OPN-a和OPN-c通过激活PI3K/Akt/NF-κB信号转导通路而增强胶质瘤细胞侵袭力.

关键词：骨桥蛋白质、剪接体、脑肿瘤、神经胶质瘤、聚合酶链反应、衔接蛋白质类、信号转导

所属期刊栏目：9

分类号：R73;R58

资助基金：国家自然科学基金资助项目30672165;江苏省医学重点人才项目RC2007061

在线出版日期：2010-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：562-570