帕金森病小鼠模型脑黑质区热休克蛋白的表达

摘要：

目的应用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备帕金森病小鼠模型,观察中脑黑质部位热休克蛋白(hsps)的表达.方法175只C57BL小鼠分为4组:MPTP组,56只小鼠连续5d腹腔注射MPTP[30mg/(kg·d)],制备帕金森病小鼠模型;生理盐水组,56只小鼠连续5d腹腔注射生理盐水0.3ml/d(容积与MPTP组同);假手术组,56只小鼠仅用注射器刺穿腹部皮肤;另7只小鼠作为正常对照组.分别于最后1次注射后4h(视为0d)及第2、4、7、10、14、21、28天处死小鼠,应用免疫印迹法(Western blot)和免疫组化检测方法观察热休克蛋白的动态变化以及在中脑的定位;经原位杂交法检测MPTP对hsp40和hsp70 mRNA表达的影响.结果免疫印迹法检测显示,MPTP组小鼠于药物注射后4h即出现hsp70表达升高,两周内与正常对照组、生理盐水组和假手术组相比差异均有显著性意义(P＜0.01),其中以第2,4天为表达高峰,之后缓慢下降,至第21天降至正常水平.MPTP组小鼠在注射后2～14d,hsp40/HDJ-1表达水平高于其余各组(P＜0.01),第4天为表达高峰.HDJ-2表达不如HDJ-1明显,仅第4天与另3组相比差异有显著性意义(P＜0.01).MPTP组小鼠在注射后第2～4天,hsp90表达水平高于正常对照组、生理盐水组和假手术组(P＜0.01);生理盐水组和假手术组小鼠hsp90的表达与正常对照组差异无显著性意义(P＞0.05).免疫组化染色显示,MPTP组小鼠hsp70和hsp40在整个黑质区均呈阳性染色;而hsp90是在黑质致密部呈阳性染色;免疫染色的变化趋势与免疫印迹法检测一致.而mRNA原位杂交检测结果表明,MPTP组小鼠的黑质致密部hsp70和hsp40 mRNA表达增加,其变化趋势亦与免疫印迹法检测结果一致.结论在经MPTP制备的帕金森病小鼠模型中,脑黑质区热休克蛋白的转录和翻译均有增加,增加的热休克蛋白可能参与拮抗MPTP的毒性而起到神经细胞保护作用.

关键词：帕金森病、热休克蛋白、印迹法、蛋白质、原位杂交、免疫组织化学、1-甲基4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶

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分类号：R74(神经病学与精神病学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划G1999054008

在线出版日期：2005-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：28-34