脐带间充质干细胞来源的外泌体通过抑制TGF-β1/Smad 3通路修复单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化

摘要：

目的 探索来源于脐带间充质干细胞(huc-MSCs)的含有腺病毒-TGF-β1 shRNA的外泌体对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠纤维化肾组织的靶向性和缓解肾间质纤维化的疗效.方法 构建单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型;腺病毒-TGF-β1 shRNA转导脐带间充质干细胞,收集其外泌体;采用纳米粒子追踪分析、透射电子显微镜、Western blot法和RT-qPCR法对外泌体及其对TGF-β1的干扰效率进行鉴定;IVIS Lumina系统荧光成像技术分析外泌体在体(in vivo)分布情况;HE染色、Masson染色、TGF-β1免疫组织化学染色(IHC)分析外泌体对UUO大鼠肾间质纤维化的疗效;Western blot法检测大鼠肾组织Collagen I、Fibrone-ctin、α-SMA以及TGF-β1、p-Smad 3和Smad 3的表达情况.结果 含有腺病毒TGF-β1 shRNA的外泌体在体外对TGF-β1具有显著的敲低效率(P<0.01).此外泌体经尾静脉注射至大鼠体内后,大部分聚集于左侧损伤肾脏,具有定向迁移能力.相对于UUO组大鼠而言,经含有腺病毒-TGF-β1 shRNA的外泌体治疗后,能够明显缓解UUO大鼠肾间质纤维化的程度,HE染色和Masson染色显示的肾间质组织胶原纤维沉积显著减少;IHC染色显示TGF-β1表达明显被抑制(P<0.01).Western blot结果显示,相较于UUO组,外泌体治疗组大鼠纤维化肾组织的Collagen I、Fibronectin和α-SMA表达显著降低(P<0.01);TGF-β1和磷酸化-Smad 3(P<0.01)被显著抑制.结论 将huc-MSCs来源的含有腺病毒-TGF-β1 shRNA的外泌体尾静脉注射至UUO大鼠体内,外泌体能够特异性靶向纤维化的肾组织并通过抑制TGF-β1/Smad 3通路修复肾间质纤维化.

关键词：肾间质纤维化、外泌体、腺病毒、shRNA、TGF-β1、单侧输尿管梗阻、大鼠

所属期刊栏目：27

分类号：R692(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)

资助基金：南通市卫生健康委员会科研课题No.WKZL2018053

在线出版日期：2022-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：593-599