10.3969/j.issn.1009-8291.2015-04-016
诱导/封闭自噬相关基因7对肾癌786-0细胞自噬的调控作用研究
目的:探讨诱导/封闭A tg7对肾癌786-0细胞自噬的调控作用。方法构建上调A tg7的慢病毒载体plenti6.3-A tg7,下调Atg7的慢病毒载体sh-Atg-1 lv、sh-Atg-2 lv ,空载对照慢病毒载体sh-scramb-con lv、plenti6.3-GFP ,分别转染肾癌786-0细胞系,未转染的786-0细胞系为空白对照。RT-PCR和Western blot检测各组Atg7的表达,研究plenti6.3-Atg7激活Atg7效率和sh-Atg-1 lv、sh-Atg-2 lv抑制Atg7效率。Western blot检测上述各组细胞LCII/LC3I蛋白比值,研究上调及下调 Atg7对肾癌786-0细胞自噬的激活及抑制作用。结果经过筛选,成功构建稳定上调Atg7的786-0/plenti6.3-Atg7xbx细胞系、稳定下调Atg7的786-0/sh-Atg-2 lv细胞系、空载对照786-0/sh-scramb-con lv、786-0/plenti6.3-GFP细胞系。与空白对照组比较,Atg7上调组786-0细胞LCII/LC3I比值显著升高(3.31±0.12 vs .2.23±0.10 P<0.01),具有稳定的自噬激活作用;Atg7下调组的786-0细胞LCII/LC3I比值显著降低(1.45 ± 0.11 vs .2.23±0.10 P<0.01),具有稳定自噬抑制作用。结论上调Atg7对肾癌786-0细胞系具有自噬激活作用,下调A tg7对肾癌786-0细胞系具有自噬抑制作用。
自噬、肾透明细胞癌、自噬相关基因7、sh-A tg7、plenti6.3-A tg7
R737.11(肿瘤学)
2015-05-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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