p53表达下调对 saRNA 介导 p21基因激活的影响研究

摘要：

目的：研究抑制 p53基因的表达是否影响小双链 RNA（dsRNA）分子 dsP21-322对p21基因表达的激活效应。方法体外培养人肾癌 ACHN 细胞（p53野生型）和膀胱癌5637细胞（p53突变型）。采用 RT-PCR 方法筛选具有抑制 p53基因表达的干扰 RNA 分子 dsP53-3。人工合成具有激活效应的 dsRNA 分子 dsP21-322，以及与人体已知 RNA 序列无同源性的阴性对照小dsRNA 分子 dsCon。将上述 dsRNA 分子转染到两种肿瘤细胞中，每种细胞均分为5组，即：①空白组；②阴性对照组；③dsP21-322单转染组；④dsP53单转染组；⑤dsP21-322与 dsP53共转染组。通过荧光染色检测转染效率，采用 Real-time PCR 和 Western-blot 技术检测各组细胞中 p53和 p21转录和翻译水平上的表达差异。结果①在单转染组中，dsP21-322能够激活 ACHN 细胞、5637细胞中 p21基因表达；②dsP53-3能够抑制 ACHN 细胞、5637细胞中 p53基因表达；③在共转染组中ACHN 细胞、5637细胞中 p53基因下调，而 dsP21-322依然能够激活 p21基因表达。结论外源合成的 saRNA 分子 dsP21-322能激活 ACHN 细胞、5637细胞中 p21基因表达，该激活效应不受p53蛋白表达量的影响。

关键词：siRNA、saRNA、RNA 干扰、RNA 激活

所属期刊栏目：7

分类号：R73;R39

在线出版日期：2016-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：350-353