MDR1 shRNA表达质粒的构建

摘要：

目的 构建由pSIREN-RetroO-ZsGreeen载体介导、表达MDR1短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)的重组质粒. 方法 分别针对MDR1基因的两个不同位点,按BamH I+Sense+Loop+Antisense+终止信号+EcoRI结构合成编码shRNA的DNA序列及其反义序列,退火连接及磷酸化形成双链后,将其依次导入pSIREN-RetroQ-ZsGreeen载体,构建成能产生MDR1 shRNA的质粒,并进行序列分析. 结果 重组质粒(pSIREN-RetroQ-ZsGreeen-A和pSIREN-RetroQ-ZsGreeen-B)经酶切与测序证实两段寡核苷酸片段成功插入到预计位点,序列完全一致,无任何碱基突变. 结论 MDR1 shRNA的表达载体pSIREN-RetroO-ZsGreeen-A和pSIREN-Ret-roQ-ZsGreeen-B成功构建,为进一步研究肿瘤多药耐药逆转奠定了实验基础.

关键词：MDR1基因、短发卡RNA、质粒

所属期刊栏目：1

分类号：R3 ;R73

资助基金：福建省自然科学基金项目2006J0092

在线出版日期：2009-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：227-229