RNAi沉默G250/MN/CAIX基因对肾癌Ketr-3细胞株生物学行为的影响

摘要：

目的 观察RNAi沉默G250基因表达后,肾癌Ketr-3细胞生长速度和体外侵袭力的变化. 方法 据G250基因的序列合成shRNA并克隆至真核表达载体pSilencer 2.1-U6-neo中,构建G250 shRNA真核表达载体,将该载体转染至人肾癌Ketr-3细胞株中.采用RT-PCR、West-ern blot及间接免疫荧光法对干扰效率进行检测.MTT法观察干扰后细胞生长情况的变化,Tran-swell小室体外侵袭实验探讨干扰后细胞体外侵袭能力的变化. 结果 成功构建了G250 shRNA的真核表达载体.RT-PCR、Western blot和间接免疫荧光检测表明转染G250 shRNA真核载体的肿瘤细胞G250/β-actin的比值明显降低.细胞生长曲线结果显示Ketr-3-MNRi组与Ketr-3组和阴性对照组Ketr-3-NC相比较,肿瘤细胞生长减慢;Ketr-3-MNRi细胞其穿膜细胞数明显低于Ketr-3-NC及Ketr-3细胞. 结论 G250 shRNA可以下调ketr-3细胞G250的过度表达,抑制肿瘤细胞生长,下调其侵袭能力,为探讨G250在肾癌的发病机制中的作用及生物学治疗肾癌提供实验基础和理论依据.

关键词：肾肿瘤、RNA干扰、基因

所属期刊栏目：1

分类号：R73;J0-

资助基金：广东省科技计划项目2007B030704002

在线出版日期：2010-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：169-173