Cbfα1在人牙本质基质蛋白1基因启动子结合位点的初步定位
目的 对核心结合因子α1(core binding factor α1,Cbfα1)在人牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)基因启动子上结合位点进行初步定位.方法 DMP1基因启动子-505~+86 bp区存在成牙本质细胞分化重要的转录调控因子Cbfα1的作用位点,为验证它对DMP1是否具有直接的转录调控作用,将计算机分析结果Cbfα1结合位点(TTGGGAACCACAAGA,-199~-185 bp)进行体外定点基因突变,双酶切和DNA测序鉴定突变效果,突变后的质粒pGL3-P’-505~-86和PCMV-Osf2共转染至体外培养的人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,HDPSCs)中,报告基因检测系统检测虫萤光素酶活性的改变,单纯转染pGL3-P-505~+86组作为空白对照.结果 与PCMV-Osf2共转染后,突变pGL3-P’-505~+86共转染组在HDPSCs中的荧光素酶活性较未突变pGL3-P 505~+86共转染组明显下降(P<0.05),突变pGL3-P’-505-+6共转染组较单纯转染pGL3-P505-+86组活性稍有升高,但无统计学意义(P>0.05).结论 Cbfα1对DMP1基因转录具有直接的调控作用,DMP1启动子-199~-185 bp区是Cbfα1的结合位点之一.
核心结合因子α1、牙本质基质蛋白1、人牙髓干细胞、结合位点
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R780.2(口腔科学)
2013-07-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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