牙本质基质蛋白1基因转染猪体细胞的实验研究

摘要：

目的 构建牙本质基质蛋白1(DMP1)绿色荧光融合蛋白pEGFP-DMP1,确定该重组质粒转染猪口腔粘膜成纤维细胞(POMFs)及骨髓间质干细胞(MSCs)的最佳条件,评价DMP1转基因修饰对细胞生物学特性及DMP1基因表达的影响.方法 构建pEGFP-DMP1真核表达载体,使用不同参数评价脂质体介导基因修饰POMFs 及MSCs的转染效率,检测转染后细胞的DMP1基因表达及蛋白表达情况.结果 成功构建DMP1真核表达载体pEGFP-DMP1,酶切后得到4.7kb和1.5kb的片段,当脂质体用量为5μl、质粒2μg、转染细胞密度为30%时,DMP1基因的表达比例最高,POMFs及MSCs的最佳转染时间分别为3h和45min.转基因48h后的细胞可见有DMP1基因表达,免疫组化染色显示DMP1阳性.结论 选择合适的转染条件可使pEGFP-DMP1绿色荧光融合蛋白重组质粒高效转染POMFs及MSCs,并可检测到DMP1基因及DMP1蛋白表达.

关键词：牙本质基质蛋白1、基因转染、成纤维细胞、间质干细胞、绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：21

分类号：R780.2(口腔科学)

在线出版日期：2007-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：406-409