农杆菌介导注射法建立番茄子叶瞬时表达系统
背景:转基因植物生产口服疫苗具有较大的优势及广阔的应用前景.目前,关于番茄瞬时表达系统的研究罕见报道,对番茄瞬时表达条件进行优化,可使植株的遗传转化效率大幅度提高.目的:利用农杆菌介导的注射法,建立番茄子叶瞬时表达系统,检测植物表达载体pCAMBIA-E8-APB-DOCK8中外源基因的转录水平.方法:通过对番茄无菌苗的培育,观察不同番茄品种的出芽数、成苗数及农艺学性状的差异显著性,筛选出适用于此实验的番茄品种,将前期构建的植物表达载体pCAMBIA-E8-APB-DOCK8转化到农杆菌EHA105中,通过对番茄子叶、注射农杆菌浓度、农杆菌注射量、生长苗龄以及共培养天数进行筛选,建立农杆菌介导的番茄子叶瞬时表达系统,观察报告基因的转录水平.结果与结论:初步建立番茄子叶瞬时表达系统,筛选出适合的番茄品种为欧洲大红(苹果型),选材部位为番茄的子叶,注射农杆菌浓度A600为0.2-0.7,农杆菌注射量为50 μL,苗龄为7-10 d,共培养24-48 h.该实验为后期外源基因蛋白表达分析研究提供一种方便、快捷和有效的方法.
番茄、农杆菌介导、瞬时表达系统构建、E8-APB-DOCK8、植物疫苗、转录分析
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R459.9;R318;R781.1(治疗学)
国家自然科学基金;贵州省委组织部贵州省第六批人才基地;遵义市首批市级人才基地遵市科合社字号,项目;贵州省教育厅青年科技人才成长项目;贵州省卫生健康委科学技术基金项目
2023-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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