血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞利于超长随意皮瓣的成活

摘要：

背景:研究证实血管内皮生长因子能够诱导新生血管形成,人羊膜间充质干细胞也可通过多种机制改善皮瓣移植的缺血再灌注损伤.因此,用血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞为促进皮瓣成活提供了可能.目的:探索局部应用血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞对超长比例随意皮瓣成活的影响.方法:将30只成年SD大鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组10只,在其背部左右分别构建2 cm×8 cm超长缺血随意皮瓣模型,皮瓣蒂部位于髂棘水平,分别为Ⅰ-left,Ⅰ-right,Ⅱ-left,Ⅱ-right,Ⅲ-left,Ⅲ-right.皮瓣掀起后即刻,Ⅰ-left、Ⅱ-left注射0.5 mL LG-DMEM培养基划分为对照组,Ⅰ-right、Ⅲ-left注射0.5 mL细胞浓度为1×109 L-1的人羊膜间充质干细胞悬液划分为实验组1,Ⅱ-right、Ⅲ-right注射0.5 mL细胞浓度为1×109 L-1转染血管内皮生长因子基因的人羊膜间充质干细胞悬液划分为实验组2,每个皮瓣共注射5点,每点注射0.1 mL.移植后即刻、24,48 h以及4,7 d,激光多普勒血流监测仪监测皮瓣中部和蒂部的血流灌注值,移植后7 d观察各组皮瓣的成活率,取成活皮瓣组织通过组织学观察各组皮瓣毛细血管密度,荧光显微镜观察人羊膜间充质干细胞在皮瓣内的分布及存活状况,Western blot检测皮瓣组织中血管内皮生长因子蛋白水平.结果与结论:①实验组2皮瓣成活率、血流灌注值、皮瓣毛细血管密度明显高于实验组1及对照组,实验组1皮瓣成活率、血流灌注值、皮瓣毛细血管密度明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);②在荧光显微镜下观察发现,实验组1、实验组2皮瓣组织内有CM-Dil标记的人羊膜间充质干细胞;③各组皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达均呈阳性,实验组2皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达明显高于实验组1及对照组,实验组1皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);④结果证实,在超长随意皮瓣中、远部位应用人羊膜间充质干细胞可明显改善皮瓣成活率;人羊膜间充质干细胞经血管内皮生长因子基因转染后能够分泌更多的血管内皮生长因子蛋白,进而促进超长随意皮瓣血管新生,提高皮瓣成活率.

关键词：超长缺血随意皮瓣模型、人羊膜间充质干细胞、血管内皮生长因子、基因转染、皮瓣成活率

所属期刊栏目：23

分类号：R459.9;R394.2(治疗学)

资助基金：贵州省科技厅基金黔科合J字LKZ[2012]30号;项目负责人:金文虎

在线出版日期：2019-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：3349-3356