miRNA-140靶向结合自噬相关基因ULK1的验证
背景:自噬可以通过抑制凋亡来缓解膝骨关节炎,miR-140是否可以调节自噬关键基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(uncoordinated 51 like kinase-1,ULK1)基因未见报道.目的:探索miRNA-140对ULK1基因的调控关系.方法:通过miRNA靶基因预测网站预测ULK1基因是否为miRNA-140的靶基因;将ULK1基因的3'端非翻译区全长序列载入海肾荧光素酶基因的下游,通过构建结合位点的突变序列,得到野生型和突变型载体,分别用野生型和突变型海肾荧光素酶载体转染293T细胞,检测每种转染细胞海肾荧光素酶的表达活性;运用miRNA-140 inhibitor对293T细胞进行干预,Western blot检测ULK1蛋白表达水平.结果与结论:与野生型载体组细胞相比,加入miR-140 mimics后荧光素酶的表达活性明显降低(P<0.01);当抑制miRNA-140后,ULK1蛋白的表达明显升高(P<0.01).结果证实,miRNA-140可以与ULK1基因靶向结合从而调控其表达.
miRNA-140、ULK1基因、软骨、自噬、凋亡、点突变、组织工程、骨关节炎、质粒、载体、转染、双荧光素酶报告法
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R318(医用一般科学)
国家中医药管理局重点专科建设项目粤中医[2012]7号;广东省自然科学基金2014A030310128;广东省中医优势病种突破项目粤中医函[2015]19号;广东省中医药局科研项目20164002,20172008,20171023
2018-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
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