OTX2基因对hFOB1.19成骨细胞增殖和分化的影响
背景:研究成骨细胞的表达及分化有助于阐明骨性反(牙合)畸形下颌骨发育过度的分子机制.目的:应用RNA干扰技术下调成骨细胞系hFOB1.19中OTX2基因的表达,进一步研究OTX2基因对成骨细胞增殖及分化的影响.方法:实验分为6组:特异性OTX2-siRNA1、OTX2-siRNA2、OTX2-siRNA3组,GAPDH-siRNA组,阴性对照组和空白对照组.设计3个靶序列的小干扰RNA(iRNA),转染人成骨细胞hFOB 1.19.RT-PCR检测转染后成骨细胞中OTX2 mRNA水平的变化;Western Blot检测蛋白质表达水平;MTT法评估OTX2-siRNA对成骨细胞增殖的抑制作用;化学比色法检测细胞碱性磷酸酶活性.结果与结论:①转染后,出现OTX2 mRNA水平下调,蛋白表达水平下调;②倒置显微镜下观察漂浮细胞OTX2-siRNA组明显多于各对照组,细胞增殖抑制率明显高于各对照组,OTX2-siRNA组碱性磷酸酶活性明显降低;③结果提示,化学合成的特异性OTX2-siRNA转染人成骨细胞系hFOB1.19,能有效下调OTX2 mRNA水平;OTX2基因表达下调能够抑制hFOB1.19成骨细胞增殖;OTX2基因表达下调可降低hFOB1.19成骨细胞碱性磷酸酶活性,抑制其分化.
hFOB1.19成骨细胞、OTX2基因、小干扰RNA、RNA干扰、基因沉默、错(牙合)畸形
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R318(医用一般科学)
沈阳市科技计划项目F15-199-1-55;辽宁省教育厅科学研究项目LK201639
2018-08-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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