人参皂苷Rg3对体外培养小鼠神经干细胞分化的影响
背景:神经干细胞来源非常有限,而且在自然分化过程中绝大多数分化为神经胶质细胞,分化为神经元的比例相对较少,因此采取有效措施诱导其向合适的子细胞方向分化是非常重要的科研课题.以往研究证明人参皂苷类成分,如Rb1和Rg1,对神经干细胞的定向分化有一定影响,但Rg3是否对神经干细胞的分化起作用鲜有报道.目的:研究人参皂苷Rg3对小鼠神经干细胞分化为神经元和星形胶质细胞的影响.方法:分离孕14 d的C57BL/6小鼠的胎鼠大脑皮质神经干细胞并传代培养,用神经干细胞特异性免疫抗体Nestin和Sox2检测神经干细胞纯度.用分化培养基联合人参皂苷Rg3(空白对照、50 nmol/L和250 nmol/L)诱导神经干细胞分化3 d,然后用神经元特异性免疫抗体Tuj1和星形胶质细胞特异性免疫抗体GFAP检测神经干细胞分化为神经元和星形胶质细胞的情况,计算Tuj1+/DAPI和GFAP+/DAPI的比例;通过实时荧光定量PCR技术检测各组细胞Tuj1和GFAP mRNA的表达水平.结果与结论:①经细胞免疫荧光实验检测传代培养的小鼠胎鼠细胞几乎全为 Nestin 和 Sox2双阳性细胞,表明成功分离培养出纯度较高的神经干细胞,可以用于后期实验;②诱导分化3 d 后,与空白对照组和250 nmol/L人参皂苷Rg3组相比,50 nmol/L人参皂苷Rg3组对神经干细胞分化为神经元具有明显促进作用(P < 0.01),而空白对照组和250 nmol/L人参皂苷Rg3组之间差异无显著性意义(P > 0.05);③诱导分化3 d后,与空白对照组相比,50 nmol/L人参皂苷Rg3组和250 nmol/L人参皂苷Rg3组对神经干细胞分化为星形胶质细胞具有促进作用(P < 0.05),而50 nmol/L人参皂苷Rg3组和250 nmol/L人参皂苷Rg3组之间差异不明显(P > 0.05);④real time PCR结果总体与细胞免疫荧光结果相似;⑤结果表明,人参皂苷Rg3在50 nmol/L浓度时能明显促进神经干细胞向神经元和星形胶质细胞方向分化;但在250 nmol/L浓度时主要促进其向星形胶质细胞方向分化,对神经元分化没有显著影响.
人参皂苷Rg3、神经干细胞、分化、神经元、星形胶质细胞、干细胞
22
R394.2
云南省高端人才引进计划20080A004;云南省干细胞和再生医学重点实验室2015DG027Talent Introduction Program of Yunnan Province,No.20080A004;Key Laboratory of Stem Cells and Regenerative Medicine of Yunnan Province,No.2015DG027
2018-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
2098-2103
