Wnt/β-catenin信号通路与脐带间充质干细胞向肝样细胞的分化

摘要：

背景:脐带间充质干细胞可在体内外诱导分化为肝样细胞,然而确切机制目前尚不清楚,研究表明Wnt/β-catenin信号通路与之密切相关.目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路对脐带间充质干细胞肝向分化的影响及其机制.方法:采用组织块贴壁法分离培养人脐带间充质干细胞,将培养至第4-6代脐带间充质干细胞分成4组,分别为对照组,常规诱导肝向分化组,激活剂Wnt3a组(在常规诱导肝向分化基础上加入20 μg/L Wnt/β-catenin信号通路激活剂Wnt3a),抑制剂Dkk-1组(在常规诱导肝向分化基础上加入20 μg/L Wnt/β-catenin信号通路抑制剂Dkk-1).分别在诱导第7,14,21,28天收集细胞,采用荧光定量PCR和Western blot检测肝细胞分化相关基因的mRNA和蛋白表达.运用PAS染色、LDL摄取实验、ICG吸收实验在诱导第28天时进行肝样细胞功能检测.结果与结论:①与对照组相比,常规诱导组、激活剂Wnt3a组、抑制剂Dkk-1组中除了CK-19 mRNA及蛋白表达均下调外(P < 0.01),AFP、ALB、HNF4α mRNA和AFP、HNF4α蛋白表达均显著上调(P < 0.05);②与常规诱导组相比,激活剂Wnt3a组AFP、ALB、HNF4α mRNA及AFP、HNF4α蛋白表达均显著下调(P < 0.05);③与常规诱导组、激活剂Wnt3a组相比,抑制剂Dkk-1组AFP、ALB、HNF4α mRNA及AFP、HNF4α蛋白表达显著增高(P < 0.05);④抑制剂Dkk-1组PAS染色、LDL摄取实验、ICG吸收实验中检测到的阳性细胞最多,常规诱导组其次,阳性细胞最少的是激活剂Wnt3a组;⑤以上结果表明,Wnt/β-catenin信号通路受抑制时可促进脐带间充质干细胞肝向分化,反之,则抑制脐带间充质干细胞肝向分化.

关键词：脐带间充质干细胞、细胞分化、肝样细胞、Wnt/β-catenin信号通路、干细胞、国家自然科学基金

所属期刊栏目：22

分类号：R394.2

资助基金：国家自然科学基金81660303;云南省科技厅-昆明医科大学联合专项项目the National Natural Science Foundation of China,No.81660303;the Yunnan Province-Kunming Medical University Joint Scientific Projects

在线出版日期：2018-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2011-2019