三种携带GFP慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞的效果

摘要：

背景:研究不同慢病毒对同一骨髓来源间充质干细胞的转染效果,筛选合适的细胞转染工具.目的:探究3种慢病毒对兔骨髓间充质干细胞转染效果的差异.方法:选择2周龄日本大耳白兔,髂骨穿刺抽取骨髓液,采用密度梯度离心法提取骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面标志物表达.分别用pTomo-GFP慢病毒、Ad-GFP慢病毒、lenti-GFP慢病毒转染骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测3种慢病毒的转染率.CCK-8法检测转染前后细胞生长活力变化.结果与结论:①培养出的细胞CD44阳性率为75.64％,CD34、CD45阳性率分别为6.14％、9.48％;②pTomo-GFP慢病毒转染后GFP表达率为2.64％、Ad-GFP慢病毒转染后GFP表达率为16.72％、lenti-GFP慢病毒转染后GFP表达率为45.24％;③各慢病毒对细胞生长存在一定影响.pTomo-GFP、Ad-GFP在第1-8天对细胞生长潜伏期和对数生长期存在影响,可能对前期细胞活性造成一定干扰.短期内lenti-GFP对细胞生长影响不大,但第12天时出现了细胞生长情况变化,考虑对细胞远期活力存在影响;④选用lenti-GFP慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞能够在保证细胞正常生长的情况下提供最大的转染效率,适用于兔骨髓间充质干细胞的示踪及基因转染等相关研究.

关键词：干细胞、骨髓干细胞、绿色荧光蛋白、间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、慢病毒、转染、转染率、生长曲线、国家自然科学基金

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分类号：R394.2

资助基金：国家自然科学基金81460340;云南省骨关节疾病诊疗省创新团队项目2014HC1018;医疗卫生内设机构研究项目2014NS161;the National Natural Science Foundation of China,No.81460340;the Yunnan Provincial Innovation Team Project for Diagnosis and Treatment of Bone and Joint Disease,No.2014HC1018;the Research Project of Medical and Health Institutions,No.2014NS161

在线出版日期：2018-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：4642-4647