5-氮杂胞苷联合血管紧张素Ⅱ诱导脂肪间充质干细胞向心肌细胞的分化

摘要：

背景:采取有效措施修复坏死心肌成为临床治疗心肌梗死的新方向.目的:探讨5-氮杂胞苷联合血管紧张素Ⅱ对小鼠脂肪间充质干细胞向心肌细胞分化的影响.方法:取20只4周龄ICR小鼠,利用Ⅰ型胶原酶消化法获得脂肪间充质干细胞,观察细胞的形态学特点,运用MT-T-法检测细胞的增殖情况,运用免疫荧光技术检测细胞表面抗原CD90,CD105,CD73,CD45的表达.第4代脂肪间充质干细胞培养24 h后,更换为含15 μmol/L 5-氮杂胞苷和15 μmol/L 5-氮杂胞苷+0.1 μmol/L血管紧张素Ⅱ的培养基诱导24 h,然后更换为完全培养基,Western Blot检测细胞中cTnT蛋白表达.结果与结论:①原代脂肪间充质干细胞胞核较小,呈梭形、星形,传代后细胞体积增大,形态趋于一致,排列规则;②第3代小鼠脂肪间充质干细胞的生长曲线呈现“S”形,第1-3天为潜伏期,第4天进入对数生长期,第5-7天细胞生长达到峰值,进入平稳期;③第4代脂肪间充质干细胞表面CD90、CD105及CD73呈阳性表达,CD45阴性表达;④5-氮杂胞苷联合血管紧张素Ⅱ组心肌细胞中cTnT蛋白表达量显著高于5-氮杂胞苷(P＜0.05);⑤结果表明,5-氮杂胞苷联合血管紧张素Ⅱ能够显著促进脂肪间充质干细胞向心肌细胞样细胞分化.

关键词：干细胞、脂肪干细胞、心肌细胞、5-氮杂胞苷、脂肪间充质子细胞、盘管紧张素Ⅱ、Ⅰ型胶原酶、Western Blot、免疫荧光技术、cTnT、心肌样细胞分化率

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分类号：R394.2

资助基金：河南科技发展攻关项目2015HNJ0031;the Scientific Development Program of Henan Province,No.2015HNJ0031

在线出版日期：2018-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：4629-4634