肿瘤坏死因子α诱导大鼠软骨细胞凋亡模型的建立及鉴定

摘要：

背景：肿瘤坏死因子α是诱导骨关节炎软骨细胞凋亡的主要细胞因子，对骨关节炎的病理进程具有重要调节作用。<br>　　目的：比较不同质量浓度肿瘤坏死因子α诱导大鼠软骨细胞凋亡模型，为进一步探讨药物对软骨细胞凋亡的调控作用提供理论支持。<br>　　方法：清洁级4周龄SD大鼠，采用机械-Ⅱ型胶原酶消化法获取膝关节软骨细胞，并用不同质量浓度的肿瘤坏死因子α(0，10，20，30，40μg/L)诱导建立软骨细胞的凋亡模型，倒置相差显微镜观察软骨细胞的形态结构，Ⅱ型胶原免疫组化鉴定软骨细胞，MTT检测软骨细胞的活性，DAPI检测软骨细胞的凋亡情况。<br>　　结果与结论：①体外培养软骨细胞，Ⅱ型胶原免疫组化染色可见胞浆呈棕黄色，为阳性细胞；②软骨细胞凋亡率，干预48 h肿瘤坏死因子α10，20，30μg/L明显高于0μg/L(P<0.01)，肿瘤坏死因子α40μg/L明显高于10μg/L(P<0.01)；③软骨细胞活性，干预48 h肿瘤坏死因子α10，20，40μg/L明显低于0μg/L(P<0.01)，肿瘤坏死因子α20μg/L明显低于10μg/L(P<0.05)，肿瘤坏死因子α40μg/L明显低于10μg/L(P<0.01)、20μg/L(P<0.05)。④结果说明，20μg/L肿瘤坏死因子α能成功建立炎症介导软骨细胞凋亡模型。

关键词：组织构建、软骨细胞、肿瘤坏死因子α、MTT、DAPI、Ⅱ型胶原鉴定、凋亡模型、炎症、国家自然科学基金

所属期刊栏目：21

分类号：R318(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金81373719；陈可冀中西医结合发展基金CKJ2015009；福建省科技厅科技计划项目2015J01479

在线出版日期：2017-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：527-531