10.3969/j.issn.2095-4344.2016.45.020
超顺磁氧化铁纳米颗粒标记人端粒酶反转录酶基因修饰神经干细胞及体外MRI成像
背景:细胞标记与体外MRI成像联合,可无创性活体标记移植的神经干细胞存在部位、存在方式及其一些生物学特性。<br> 目的:探讨超顺磁氧化铁纳米颗粒(SPIO)标记对人端粒酶反转录酶(hTERT)基因修饰神经干细胞生物学特性的影响及标记后MR成像效果。<br> 方法:体外培养大鼠骨髓来源的神经干细胞,将其分为正常神经干细胞组、SPIO标记神经干细胞组、SPIO标记空载病毒组及SPIO标记hTERT转染组。采用电穿孔法将pcDNA3-hTERT 重组质粒转染至神经干细胞,并进行SPIO标记,当神经干细胞标记成功后即行4.7T MR扫描,流式细胞仪、MTT法检测细胞周期、细胞增殖能力,RT-PCR和Western blot检测hTERT基因和蛋白的表达。<br> 结果与结论:①普鲁士蓝染色显示SPIO对神经干细胞的标记率为97%;②MRI成像显示,与正常神经干细胞组相比,SPIO标记神经干细胞组的T2及T2*弛豫时间均显著下降,相应的弛豫率则显著升高(P<0.01);③与正常神经干细胞比较,SPIO标记的3组神经干细胞增殖能力相比明显增强,处于G0-G1及S期的比例明显增多;④与SPIO标记神经干细胞组、SPIO标记空载病毒组比较,SPIO标记hTERT转染组hTERT mRNA及蛋白的表达均明显增强;⑤结果表明,在体外超顺磁性氧化铁能够高效标记神经干细胞,经hTERT基因修饰后能够稳定表达hTERT基因,细胞增殖能力显著增强,4.7T MR仪能够对标记后的细胞有效进行体外成像。
干细胞、培养、神经干细胞、氧化铁标记、超顺磁性氧化铁粒子、hTERT、基因修饰、磁共振成像
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R394.2
2016-12-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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