调控脂肪间充质干细胞成软骨分化基因Sox-9和低氧诱导因子1α的表达

摘要：

背景：有学者采用基因转染的方法诱导脂肪间充质干细胞向软骨细胞分化，使种子细胞能够稳定合成和分泌特定的细胞因子，从而达到长期稳定刺激种子细胞增殖、分化和软骨形成的目的。<br>　　目的：观察胰岛素样生长因子1基因转染对兔脂肪间充质干细胞低氧诱导因子1α和Sox-9表达的影响。<br>　　方法：①取成年新西兰大耳白兔颈后部皮下脂肪组织，分离、培养兔脂肪间充质干细胞，免疫荧光法鉴定后在脂质体介导下应用pcDNA3.1-IGF-1基因转染脂肪间充质干细胞，G418筛选，获得稳定转染的细胞株；②实验分为3组：正常传代培养的脂肪间充质干细胞；转染pcDNA3.1的脂肪间充质干细胞；转染pcDNA3.1-IGF-1的脂肪间充质干细胞。③RT-PCR及Western blot法检测转染后细胞中胰岛素样生长因子1的表达，MTT法绘制细胞增殖曲线，Dil荧光染料标记后计数细胞增殖效率，免疫荧光法分析转染后细胞低氧诱导因子1α和Sox-9的表达情况，DMMB定量测定总糖胺聚糖含量。<br>　　结果与结论：①成功构建稳定表达pcDNA3.1-IGF-1的细胞株，RT-PCR及Western blot检测证实转染后的细胞株在mRNA水平上获得胰岛素样生长因子1的表达，并且成功翻译为蛋白；②MTT提示转染后细胞增殖活性增强；③胰岛素样生长因子1基因转染显著提高Dil标记脂肪间充质干细胞的增殖效率；④转染后细胞的低氧诱导因子1α和Sox-9表达阳性；⑤胰岛素样生长因子1基因转染组糖胺聚糖含量明显高于其他2组(P<0.01)。⑥结果说明，胰岛素样生长因子1基因转染能够能够有效促进脂肪间充质干细胞增殖，促使阳性表达低氧诱导因子1α和成软骨分化调控基因Sox-9，并有效促进细胞分泌软骨细胞外基质糖胺聚糖。

关键词：干细胞、脂肪干细胞、胰岛素样生长因子1、脂肪间充质干细胞、低氧诱导因子1、SOX-9、辽宁省自然科学基金

所属期刊栏目：20

分类号：R394.2

资助基金：辽宁省自然科学基金资助项目20102264@@@@Funding:the Natural Science Foundation of Liaoning Province, No.20102264

在线出版日期：2016-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：6766-6773