10.3969/j.issn.2095-4344.2016.15.006
软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1低表达的意义
背景:肿瘤坏死因子α是骨关节炎主要致病因子,主要通过激活核因子KB信号通路活性实现软骨细胞炎症反应。细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1参与调节多种细胞因子诱导的细胞炎症反应。<br> 目的:观察大鼠软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1对炎症因子肿瘤坏死因子α反应中的作用。<br> 方法:将慢病毒包装的低密度脂蛋白受体相关蛋白1-shRNA转染原代培养的软骨细胞。转染3 d后用核因子κB磷酸化抑制剂Bay 11-7082(10μmol/L)预处理的阴性对照组和shLRP1组软骨细胞30 min,肿瘤坏死因子α(30μg/L)分别作用两组软骨细胞30 min,收集总蛋白并进入后续Western blot的实验,测定相关胞内信号蛋白表达情况,收集总RNA并行Real-time PCR实验检测相关RNA表达情况。收集肿瘤坏死因子α(30μg/L)作用软骨细胞12 h的培养基行ELISA检测基质金属蛋白酶13表达水平。<br> 结果与结论:①慢病毒介导敲低低密度脂蛋白受体相关蛋白1后的软骨细胞肿瘤坏死因子α受体1表达增加;②肿瘤坏死因子α作用后的shLRP1组软骨细胞核因子kB通路较对照组均有明显激活,诱导型一氧化氮合酶表达增加;③ELISA检测提示shLRP1组胞外基质金属蛋白酶13浓度增加;④结果提示,软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1低表达对炎症因子肿瘤坏死因子α的作用表现为激活核因子kB通路和提高骨关节炎相关的蛋白基质金属蛋白酶13表达以及易凋亡。
组织构建、软骨细胞、低密度脂蛋白受体相关蛋白1、肿瘤坏死因子α、慢病毒、NF-kB
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R318(医用一般科学)
2016-06-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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