滋养干细胞转录因子叉头蛋白D3过表达在人绒癌细胞株JAR的恶性生物学特性中的作用研究

摘要：

养细胞相比，绒癌细胞株JAR中叉头蛋白D3的转录和蛋白水平表达均显著增高。短发夹RNA干扰叉头蛋白D3表达抑制了体外JAR的细胞增殖、迁移和侵袭功能，同时抑制了裸鼠体内肿瘤的生长，降低了肿瘤细胞β-人绒毛膜促性腺激素分泌。通过初筛和后期验证，发现7个受叉头蛋白 D3调控的局部黏附分子(ITGA5, ITGB6, THBS4, COL6A3, VTN, NRXN3和NLGN1)，同时短发夹RNA干扰叉头蛋白D3表达后，JAR细胞内局部黏附激酶活性降低。提示过表达的叉头蛋白D3通过调控局部黏附分子表达和局部黏附激酶活性进而增强JAR的恶性生物学特性。<br>　　背景：绒毛膜细胞癌是一种具有高度侵袭能力的滋养细胞肿瘤。叉头蛋白 D3作为胚胎干细胞和滋养干细胞的转录因子，在胚胎发生、肿瘤发生和进展等很多生理、病理状态下发挥着重要作用。<br>　　目的：研究叉头蛋白D3在绒毛膜细胞癌恶性生物学特性中的作用及可能作用机制。<br>　　方法：利用短发夹 RNA 干扰叉头蛋白D3在人绒毛膜细胞癌细胞株JAR 中的表达，体外细胞增殖、迁移/侵袭实验检测JAR的细胞功能学改变，体内动物成瘤实验检测肿瘤生长情况。Agilent转录表达芯片初筛叉头蛋白 D3调控下游基因并通过定量实时PCR验证。<br>　　结果与结论：与原代培养的正常妊娠滋养细胞相比，绒癌细胞株JAR中叉头蛋白D3的转录和蛋白水平表达均显著增高。短发夹RNA干扰叉头蛋白D3表达抑制了体外JAR的细胞增殖、迁移和侵袭功能，同时抑制了裸鼠体内肿瘤的生长，降低了肿瘤细胞β-人绒毛膜促性腺激素分泌。通过初筛和后期验证，发现7个受叉头蛋白 D3调控的局部黏附分子(ITGA5, ITGB6, THBS4, COL6A3, VTN, NRXN3和NLGN1)，同时短发夹RNA干扰叉头蛋白D3表达后，JAR细胞内局部黏附激酶活性降低。提示过表达的叉头蛋白D3通过调控局部黏附分子表达和局部黏附激酶活性进而增强JAR的恶性生物学特性。

关键词：干细胞、肿瘤干细胞、绒毛膜细胞癌、JAR、叉头蛋白D3、增殖、迁移、侵袭、黏附分子、黏附激酶、短发夹RNA干扰、基因芯片、国家自然科学基金

所属期刊栏目：20

分类号：R73;R53

资助基金：Funding:the National Natural Science Foundation of China, No.81072140,81172477;the国家自然科学基金81072140，81172477;上海交通大学医工交叉项目YG2013MS67，YG2014QN11

在线出版日期：2016-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1409-1418